交响曲一开头，就从小提琴声部涌出一个激动焦虑的主题。它用愁苦压抑的音调，三次敲击着生活大门，然后痛切地一向上昂头，又用不安的节奏断续轻轻敲击下去。当音乐转为舒展连绵时，一支沉浸于小调忧郁色彩中的旋律，倾吐出作曲家更深的伤感。有人认为，这个主题与莫扎特《费加罗婚礼》中的一段爱情咏叹调相似，但这个交响曲主题与青年人爱恋之中的那种又愉快、又不安的心情截然不同，它全然处在一种不可解脱的痛苦思绪之中。它作为交响曲第一乐章的主部主题，奠定了音乐的悲凉基调。这部作品因而被喻为莫扎特的“命运交响曲”。 在向副部主题过渡中，音乐显示出冲决痛苦网罗的气势。但很快就被一个小节的休止打断。在小提琴轻微叹息中，双簧管奏出一段安谧的旋律。它那精细雕琢的音符，闪现着莫扎特乐观开朗的天性，就象作曲家传记中写的那样：处于赤贫中的作曲家出去一个下午，跑进家里，手里总拿着小包的糖和咖啡，喊着“哎，亲爱的妈妈，吃一点儿点心吧！” 但是，副部主题这点明快气息也没有持续下去。一声不协和的音响，乐章色彩骤变。主部主题六次转换调往愈益紧张；它游移于乐队各个角落，痛苦急促地到处撞击，不曾有一刻稳定与安宁。 第一乐章在倍受生活折磨的痛苦气氛中结束。