歌剧的序曲以奏鸣曲的形式从统一全剧的降E开始，暗示“夜女王”的威严。在小提琴优雅的序奏后，进入莫扎特最拿手的、精巧的赋格曲段落，由各种乐器反覆展开后，呈现出一幅绮丽的音画，那清澄晶亮的色彩，如同由阳光与花香、幸福与欢笑所交织而成的。序曲的尾声充满了柔美、宁静的气氛。