第二幕，第一场：皇宫内的一室。伊芝梅娜对华纳杰悲诉说，以前对她立下的爱的盟誓，而今已消失到何处，华纳杰辩解因两人远离后热情冷却了。当伊芝梅娜威胁说要禀告父王时，他说随你便，唱出：《把我过去的事都告诉国王吧》(va，I’error mio palesa)，唱完就走了。这时国王来到，伊芝梅娜便把事情始末一五一十都抖出来。国王听了很生气，然后劝她和席法烈结婚。国王也发觉阿丝芭吉亚对自己很冷淡，误以为她跟华纳杰恋爱了。于是把席法烈叫来，告诉他阿丝芭吉亚和华纳杰的背叛，要他转告这两人国王在生气，唱完退场。接着，席法烈便问阿丝芭吉亚：“你是不是真的爱上哥哥？”她终于告白说：“我所爱的是你。”席法烈听后唱出：《我必须远离你》( Lungi da te)，因为内心虽然爱着她，但这是不义之爱，感到无比痛苦。唱完他便离开。阿丝芭吉亚也感到非常苦恼，唱出：《这是肝肠寸断的痛苦》(Nel grave tormento)。第二场：米特里达特王的军营。国王命令华纳杰向罗马进攻，但儿子却反对说这是不智之举。席法烈则表示，愿意带兵应战。这时罗马护民官马齐欧来到，国王得悉华纳杰和他有来往，极为 愤怒，命令部下把华纳杰逮捕。然后要马齐欧把此事转告给罗马，并且把他驱逐出境。华纳杰不服气地说：“背叛者不只是我一个人，获得阿丝芭吉亚之爱的男人， 是席法烈！”于是国王便叫来阿丝芭吉亚，告诉她自己又得前往沙场，命令她和儿子席法烈结婚，借此试探她的心意。但阿丝芭吉亚却冷静回答：“我是国王的妻子”，而 国王又追问说：“那么你是爱华纳杰了？”最后她终于透露出自己所爱的人是席法烈。国王听了愤怒地唱出：《我要抛弃慈悲了》，唱完便离开。席法烈和阿丝芭吉 亚在这种无法收拾的局面下，只好决定同时殉情。