第一乐章，E小调，奏鸣曲式。序奏大提琴先如圣咏般地奏出冥想般的旋律，然后各件乐器以沉思的形态给予剪影，使序奏成为一种精神的中心旋律。主部先以第三、第四圆号呈示第一主题，五声音阶的进行与切分音使用，突出该主题特性。这个主题被认为和黑人灵歌《流吧，约旦河》有连带关系。也有人认为，切分音与五声音阶的进行与居住匈牙利和波西米亚境内的马扎儿民俗曲调有某种“乡愁”的联系。第一主题展开后，是由长笛和双簧管以G小调呈现第二主题。此主题为黑人灵歌《老摩西卖玫瑰》的旋律。而呈示部小结尾的旋律来自黑人灵歌《马车自天上来》。在发展部，这个旋律被突出，而第一主题的发展则更巧妙自由。音乐评论家们认为，这是德沃夏克对美国这块新大陆纷至沓来印象的反应和对有色人种命运的同情。