第二乐章（甚缓的行板），贝多芬的标题为“小河旁边之情景”，降B大调（F大调的下属调），八-十二拍，奏鸣曲式。开头弦乐器演奏出一个模拟流水的动机；大提琴部分有所分工，只有两位乐手演奏流水动机，其余的与低音提琴一同作拨弦的伴奏。 该乐章缓和、宁静，描绘了作者陶醉于小溪边美丽景致时的感受。尾声从第124小节开始。乐章结尾处（第130小节）有一个由三种木管乐器演奏的华彩段，模拟了三种不同的鸟叫声。贝多芬在乐谱上作出了标示：夜莺（长笛）、鹌鹑（双簧管）、布谷鸟（单簧管）。这一做法在当时引起了争议。